Browsing by Author "Cansaran, Demet Duman"

Now showing 1 - 1 of 1
  • No Thumbnail Available
    Item
    Vulpinik asit liken sekonder metabolitinin meme kanser hücre hatları üzerine sitotoksik etkisinin ve apoptozla ilgili genlere ait mRNA ifade seviyelerinin belirlenmesi
    (2016) Kılıç, Nil; Aras, Emine Sümer; Cansaran, Demet Duman
    Meme kanseri kadınlarda en sık görülen kanser tipidir. Meme kanseri tedavisindeki ilaçlarakarşı direnç gelişmesi nedeniyle tedavide başarı oranı düşmektedir. Bu nedenle alternatifterapötik özellikli ajanların keşfi kanser hastaları için umut kaynağı olmaktadır. Vulpinik asit(VA) MDA-MB-231, MCF-7, BT-474, SK-BR-3 ve normal meme hücre hattı (MCF-12A)üzerinde 48 saat süre ile antiproliferatif etkisinin değerlendirilmesi sonrasında apoptotik etkinintespiti amaçlı flow sitometri, kazpaz-3 aktivitesi belirlenmiştir. Ayrıca apoptoz belirteci olarakTP53, Bax, Bcl-2, BIRC5 ve ekspresyonu degişmeyen gen olarak GAPDH, Kaspaz 3, 7, 8, 9genlerin ifade analizi mRNA düzeyinde belirlenmiştir. Elde edilen veriler; VA 100, 50, 35, 25,15, 12.5, 6.25, 3.125, 1.56 ve 0.78’den oluşan konsantrasyonların MTT testi sonuçları ilehesaplanan EC50 değerlerine göre MDA-MB-231 için 11 μM, SK-BR-3 için 10 μM, 18 μMolarak MCF-7 ve BT-474 için 5 μM olarak hesaplanmıştır. Gerçekleştirilen flow sitometrisonucunda en yüksek hücre ölümü MCF-7 hücresinde %53 olarak görülürken, en düşük hücreölümü %29 olarak BT-474’de görülmüştür. Kaspaz-3 aktivite sonuçlarına göre tüm hücreleriçin kaspaz aktivitesi %10-13 arasındaki oranlarda artmıştır. Real Time PCR sonuçlarına göreproapoptotik genlerin ifadesi artarken antiapoptotik gen ifadesi azalmıştır. Sonuçlardeğerlendirildiğinde doğada bol ve kolay bulunan liken türlerinden hızlı, maliyeti düşük veuygulaması etkin sekonder metabolitlerin eldesi ile meme kanseri tedavisinde alternatif birterapötik ajan olarak kullanılmalarını sağlayacak çalışmalara önemli bir basamak oluşturmuştur. Abstract Breast cancer is the most common cancer type in women. The success rate for treatment isreduced due to the development of drug resistance in breast cancer treatment. Therefore,discovery of alternative therapeutic capable agent may be a source of hope for patients withcancer. In this context, it is designed for the determination of apoptotic effects using flowcytometry and caspase-3 activity after the evaluation antiproliferative effect of Vulpinic acid(VA) 48 hours oncancer cell line such as MDA-MB-231, MCF-7, BT-474, SK-BR-3 andnormal breast cell line such as MCF-12A. Also analysis of mRNA levels were determined forTP53, Bax, Bcl-2, BIRC5 as apoptosis markers and caspase-3, 7, 8, 9 gene expression. Theresulting data; MTT assay results were obtained according to concentration including VA 100,50, 35, 25, 12.5, 6.25, 3.125, 1.56 and 0.78. The value of EC50 which were calculatedaccording to MTT results were indicated that 11 µM for MDA-MB-231, 10 µM for SK-BR-3,18 µM for MCF-7 and 5 µM for BT-474. According to the flow cytometry results, the highestcell death was determined to be 53% in MCF-7 cells and the lowest cell death was shown to be29% in BT-474. The caspase-3 activities were increased by 10-13% for all the cancer cells.According to Real Time PCR results, proapoptotic genes expression value were increased, butantiapoptotic gene expression value were decreased in our study. Our results weredemonstrated, used of secondary lichen metabolites which low cost and effective application inthe treatment of breast cancer as an alternative therapeutic agents to provide an important step.