Klinikte gerçekleştirilen rutin ovaryohisterektomi operasyonlarından elde edilen köpek uteruslarında erken gebelik, erken/ geç metöstrus ve anöstrus dönemlerinde lenfosit alt gruplarının belirlenmesi
No Thumbnail Available
Date
2011
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Ankara Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri
Abstract
Bu çalışmada gebe ve gebe olmayan köpeklerde uterusta mevcut olan lenfositlerin ve lenfosit alt gruplarının kalitatif ve kantitatif olarak değerlendirilmesi ve bununla bağlantılı olarak gebeliğin erken dönemlerinde annenin yavruya karşı oluşturacağı hücresel immun yanıta ilişkin yeni bilgilere ulaşılması amaçlanmıştır. Çalışmada Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Doğum ve Jinekoloji Anabilim Dalı Kliniği’ne rutin ovariohisterektomi operasyonu için getirilen ve anamnezinde erken dönem gebelik, erken/geç metöstrus veya anöstrus olduğu belirlenen toplam 20 adet dişi köpeğe ait uterus dokusu kullanılmıştır. Çalışma Viyana Veteriner Üniversitesi Doğum Kliniği ve İmmünoloji Enstitüsü ile birlikte yürütülmüştür. Köpeklerden elde edilen uteruslar dört çalışma grubunda değerlendirilmiştir. Buna göre; Grup 1’i-erken gebelik; Grup 2’yi erken metöstrus; Grup 3’ü geç metöstrus ve Grup 4’ü ise kontrol grubu olarak anöstrustaki hayvanlar oluşturmuştur. Alınan doku örnekleri RNA analizleri ve lenfosit tiplendirmelerinin yapılabilmesi için iki farklı teknikle dondurulup saklanmış, analizler, Flow Cytometry yöntemi, spesifik antikorlar (belirlenmiş köpek lenfosit alt tiplerinin yüzeysel yapılarına karşı) yardımı ve Real Time PCR yöntemleriyle Viyana Veteriner Üniversitesi Doğum Kliniği ve İmmünoloji Enstitüsü’nde gerçekleştirilmiştir. Yapılan analizlerle intrauterin lenfositlerin uterusta flow sitometri yöntemi ile saptanabileceği ve tiplendirilebileceği gösterilmiştir. Kalitatif RT- PCR ile yapılan kontroller sonucunda post implantasyon 10-12. günlerde embryo saptanan gebelik ve embryo saptanmayan diöstrus dönemi için yapılan karşılaştırmada post implantasyon dönemde ve diöstrus döneminde uterusta CD4 için mRNA saptanabilirken, CD8 için saptanamamıştır. MHC-I ve MHC-II için ise post implantasyon ve diöstrus döneminde mRNA saptanmıştır. NK hücrelerinin gebelik ve metöstrus döneminde değişimi bakımından ise farklılıklar olduğu belirlenmiştir. CD3 hücrelerinde, metöstrus döneminde diğer dönemlere göre istatistiksel yönden önemli ölçüde bir artış meydana gelirken (P0.05), gebelik döneminde hem CD16 hem de CD3 hücrelerinde çok önemli bir düzeyde düşüşler (P0.01) belirlenmiştir. Flow sitometrik yöntem uterustaki bu çalışmada ilk defa kullanıldığından birbiri ile ilişkili diğer T-lenfosit alt grupları ile karşılaştırılarak endometriyumda hangi hücrelerin bu yöntemle saptanabileceği ortaya konulmalıdır. Ayrıca gebelik açısından önemli olan progesteron, relaksin, prolaktin gibi hormonlarla söz konusu faktörlerin karşılaştırılıp aralarındaki ilişkinin ortaya konulabilmesi için bu alanda yapılan çalışmaların sürdürülmesi ve kapsamının genişletilmesi gerekmektedir.
Description
Keywords
Hayvan kültürü